Tris หรือ trimethylolaminomethane เป็นสารประกอบอินทรีย์ที่สำคัญซึ่งมีการใช้งานที่หลากหลาย ในการใช้งานเฉพาะบางอย่าง เช่น วิศวกรรมชีวการแพทย์ การสังเคราะห์ทางเคมีระดับสูง- ฯลฯ จำเป็นต้องมีทริสที่มีความบริสุทธิ์สูง- มีคำอธิบายวิธีการทำให้บริสุทธิ์ด้วย Tris ทั่วไปหลายวิธีดังนี้
1. วิธีการตกผลึก
วิธีการตกผลึกเป็นวิธีการทำให้บริสุทธิ์แบบคลาสสิกซึ่งเหมาะสำหรับการทำให้สารประกอบอินทรีย์หลายชนิดบริสุทธิ์ ในกรณีของทริส สามารถใช้วิธีการตกผลึกเพื่อทำให้บริสุทธิ์ได้ ขั้นตอนเฉพาะมีดังนี้:
1. เติมตัวทำละลายในปริมาณที่เหมาะสม เช่น เอทานอล อะซิโตน ฯลฯ ลงในสารละลายทริส เพื่อลดความสามารถในการละลายของทริส
2. วางสารละลายไว้ในสภาพแวดล้อมที่มีอุณหภูมิต่ำ- เช่น ตู้แช่แข็งในตู้เย็น เพื่อส่งเสริมการตกผลึกและการตกตะกอนของทริส
3. กรองผลึกทริสที่ตกตะกอนออกและรวบรวมเหล้าแม่
4. สุราแม่ถูกทำให้แห้งในสภาพแวดล้อมสุญญากาศเพื่อให้ได้ทริสที่มีความบริสุทธิ์สูง-
ข้อดีของการทำให้บริสุทธิ์ด้วยการตกผลึกของ Tris คือใช้งานง่ายและมีต้นทุนต่ำ แต่ต้องใช้ตัวทำละลายจำนวนมาก และสุราหลักยังคงมีสิ่งเจือปนอยู่จำนวนหนึ่ง ซึ่งต้องมีการแยกและทำให้บริสุทธิ์เพิ่มเติม
2. วิธีแลกเปลี่ยนไอออน
การแลกเปลี่ยนไอออนเป็นวิธีการแยกและทำให้บริสุทธิ์ที่ใช้กันทั่วไปในการทำให้สารประกอบไอออนิกและสารประกอบอินทรีย์บริสุทธิ์ ในกรณีของทริส สามารถใช้การแลกเปลี่ยนไอออนเพื่อทำให้บริสุทธิ์ได้ ขั้นตอนเฉพาะมีดังนี้:
1. ส่งสารละลายทริสผ่านคอลัมน์แลกเปลี่ยนไอออน และทำปฏิกิริยาการแลกเปลี่ยนกับตัวแลกเปลี่ยนไอออน
2. รวบรวมน้ำทิ้งและดำเนินการบำบัดน้ำเสีย เช่น การล้างไต การระเหย เป็นต้น
3. สารละลายแยกเกลือจะทำให้เข้มข้นและทำให้แห้งเพื่อให้ได้ทริสที่มีความบริสุทธิ์สูง-
ข้อดีของการทำให้บริสุทธิ์ด้วยการแลกเปลี่ยนไอออนของ Tris คือใช้งานง่าย มีความละเอียดสูง และสามารถกำจัดสิ่งสกปรกได้อย่างมีประสิทธิภาพ แต่ต้องใช้ตัวแลกเปลี่ยนไอออนจำนวนมาก และต้องมีการบำบัดการแยกเกลือออกจากน้ำในภายหลัง และมีค่าใช้จ่ายสูง
3. การแยกโครมาโตกราฟี
การแยกโครมาโตกราฟีเป็นวิธีการแยกและการทำให้บริสุทธิ์ที่มีประสิทธิภาพสำหรับการแยกและทำให้ของผสมที่ซับซ้อนบริสุทธิ์ ในกรณีของทริส สามารถใช้การแยกโครมาโทกราฟีเพื่อทำให้บริสุทธิ์ได้ ขั้นตอนเฉพาะมีดังนี้:
1. สารละลายทริสจะถูกส่งผ่านคอลัมน์โครมาโตกราฟี และแยกด้วยการดูดซับและการชะด้วยเฟสที่อยู่นิ่ง
2. เก็บสารชะล้าง และดำเนินการทำให้เข้มข้นและทำให้แห้งเพื่อให้ได้ทริสที่มีความบริสุทธิ์สูง-
ข้อดีของการแยกโครมาโตกราฟีเพื่อการทำให้ Tris บริสุทธิ์คือความละเอียดสูง ผลการแยกที่ดี และการกำจัดสิ่งเจือปนอย่างมีประสิทธิภาพ แต่ต้องใช้คอลัมน์และเฟสที่มีราคาแพงซึ่งอยู่นิ่ง และจำเป็นต้องมีความเข้มข้นและการบำบัดการทำให้แห้งในภายหลัง ซึ่งมีค่าใช้จ่ายสูง
4. วิธีการแยกอิเล็กโทรโฟเรซิส
วิธีการแยกด้วยไฟฟ้าเป็นวิธีการแยกและทำให้บริสุทธิ์โดยการกระทำของสนามไฟฟ้า ซึ่งเหมาะสำหรับการแยกและทำให้บริสุทธิ์ของอนุภาคที่มีประจุ สำหรับทริส สามารถใช้การแยกอิเล็กโตรโฟเรติกเพื่อทำให้บริสุทธิ์ได้ ขั้นตอนเฉพาะมีดังนี้:
1. วางสารละลาย Tris ลงในถังอิเล็กโตรโฟเรซิส และเติมบัฟเฟอร์ที่เหมาะสม
2. หลังจากเติมพลังงาน อนุภาคที่มีประจุ Tris จะถูกแยกและเพิ่มสมรรถนะด้วยสนามไฟฟ้า
3. รวบรวมสารละลายทริสเข้มข้น และดำเนินการทำให้เข้มข้นและทำให้แห้งเพื่อให้ได้ทริสที่มีความบริสุทธิ์สูง-
ข้อดีของการทำให้บริสุทธิ์ของ Tris โดยการแยกด้วยไฟฟ้าคือประสิทธิภาพในการแยกสูง ความเร็วรวดเร็ว และสามารถกำจัดสิ่งสกปรกได้อย่างมีประสิทธิภาพ แต่ต้องใช้เครื่องมือและบัฟเฟอร์อิเล็กโตรโฟเรซิสที่มีราคาแพง และต้องมีความเข้มข้นและการบำบัดการทำให้แห้งตามมา ซึ่งมีค่าใช้จ่ายสูง
โดยสรุป วิธีการข้างต้นสามารถใช้ในการทำให้ทริสบัฟเฟอร์ชีวภาพบริสุทธิ์ได้ ในการใช้งานจริง จำเป็นต้องเลือกวิธีการทำให้บริสุทธิ์ที่เหมาะสมตามเงื่อนไขและข้อกำหนดของการทดลองเฉพาะ สำหรับกระบวนการผลิตขนาดใหญ่- จำเป็นต้องพิจารณาปัจจัยอย่างครอบคลุม เช่น ผลการทำให้บริสุทธิ์ ต้นทุน และประสิทธิภาพการผลิต เพื่อกำหนดแผนการทำให้บริสุทธิ์ที่ดีขึ้น
